常見引起色譜峰異常的因素有：

1.色譜柱連接管路不正確；2.連接件卡進(jìn)柱子后客戶的處理；3.HPLC常用色譜柱接頭；4.色譜柱活化不到位；5.不同品質(zhì)試驗(yàn)用水導(dǎo)致鬼峰；6.柱溫的應(yīng)用

     色譜柱連接管路不正確

     連接件卡住后客戶的處理：

  HPLC常用色譜柱接頭:

  樣品：
               1.苯丙氨酸     2.5-苯基-3,6-二氧-2-哌嗪乙酸
               3.Asp-Phe      4.天冬甜素

色譜柱活化不到位：

新色譜柱和長時(shí)間不適用的色譜柱都建議活化

活化的重要性

• 1）運(yùn)輸或儲(chǔ)存過程中不可避免干涸掉的填料盡可能盡可能的浸潤，使填料恢復(fù)活性；

• 2）不同品牌溶劑之間的差異，可能引起噪音增加，漂移增大，盡可能的置換掉保存溶劑；

• 3）加大進(jìn)樣量或者連續(xù)多次進(jìn)樣的方式，屏蔽掉系統(tǒng)和柱子的活性點(diǎn)，避免對(duì)樣品峰形產(chǎn)生影響。

活化的注意事項(xiàng)：

• 1）柱子中的保存液體與使用的流動(dòng)相之間要互溶，如果不溶請(qǐng)使用中介流動(dòng)相（異丙醇，或4-二噁烷等），由于中介流動(dòng)相黏度大，請(qǐng)使用低流速；

• 2）使用廠家推薦的活化程序；

• 活化推薦步驟：

• 反相柱（流速：0.5ml/min，每個(gè)步驟時(shí)間：120min）：

• 100%甲醇（或乙腈）—60%甲醇（或乙腈）—20%甲醇（或乙腈）——60%甲醇（或乙腈）—100%甲醇（或乙腈）

• 正相柱（流速：0.5ml/min，每個(gè)步驟時(shí)間：120min）：：100%甲醇（或乙腈）：

• 正相條件使用：

• 正己烷—流動(dòng)相

• 反相條件使用：

• 異丙醇—乙腈—60%乙腈

• H型強(qiáng)陽離子交換磺化交聯(lián)苯乙烯-二乙烯基笨共聚填充劑：

• PH=2.5硫酸水溶液，85℃，0.5ml/min，12小時(shí)以上。

• 不同品質(zhì)實(shí)驗(yàn)用水導(dǎo)致鬼峰：