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導(dǎo)致色譜峰異常的可能原因

 常見(jiàn)引起色譜峰異常的因素有:

1.色譜柱連接管路不正確;2.連接件卡進(jìn)柱子后客戶(hù)的處理;3.HPLC常用色譜柱接頭;4.色譜柱活化不到位;5.不同品質(zhì)試驗(yàn)用水導(dǎo)致鬼峰;6.柱溫的應(yīng)用

 

     色譜柱連接管路不正確

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     連接件卡住后客戶(hù)的處理:

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  HPLC常用色譜柱接頭:

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  樣品:
               1.苯丙氨酸     2.5-苯基-3,6-二氧-2-哌嗪乙酸
               3.Asp-Phe      4.天冬甜素

色譜柱活化不到位:

新色譜柱和長(zhǎng)時(shí)間不適用的色譜柱都建議活化

活化的重要性

  • 1)運(yùn)輸或儲(chǔ)存過(guò)程中不可避免干涸掉的填料盡可能盡可能的浸潤(rùn),使填料恢復(fù)活性;

  • 2)不同品牌溶劑之間的差異,可能引起噪音增加,漂移增大,盡可能的置換掉保存溶劑;

  • 3)加大進(jìn)樣量或者連續(xù)多次進(jìn)樣的方式,屏蔽掉系統(tǒng)和柱子的活性點(diǎn),避免對(duì)樣品峰形產(chǎn)生影響。

活化的注意事項(xiàng):

  • 1)柱子中的保存液體與使用的流動(dòng)相之間要互溶,如果不溶請(qǐng)使用中介流動(dòng)相(異丙醇,或4-二噁烷等),由于中介流動(dòng)相黏度大,請(qǐng)使用低流速;

  • 2)使用廠(chǎng)家推薦的活化程序;

  • 活化推薦步驟:

  • 反相柱(流速:0.5ml/min,每個(gè)步驟時(shí)間:120min):

  • 100%甲醇(或乙腈)—60%甲醇(或乙腈)—20%甲醇(或乙腈)——60%甲醇(或乙腈)—100%甲醇(或乙腈)

  • 正相柱(流速:0.5ml/min,每個(gè)步驟時(shí)間:120min)::100%甲醇(或乙腈):

  • 正相條件使用:

  • 正己烷—流動(dòng)相

  • 反相條件使用:

  • 異丙醇—乙腈—60%乙腈

  • H型強(qiáng)陽(yáng)離子交換磺化交聯(lián)苯乙烯-二乙烯基笨共聚填充劑:

  • PH=2.5硫酸水溶液,85℃,0.5ml/min,12小時(shí)以上。

  • 不同品質(zhì)實(shí)驗(yàn)用水導(dǎo)致鬼峰:

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