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飼料中維生素E的液相(HPLC)檢測方案

近期,隨著經(jīng)濟的復(fù)蘇,維生素類飼料添加劑銷售量大大增加,尤其是維生素E飼料添加劑,所以飼料中維生素E的檢測就顯得尤為緊急和重要。

賽智科技應(yīng)用檢測部參考國標(GB/T 17812-2008),利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色譜儀經(jīng)實踐檢測可提供飼料中維生素EHPLC檢測方案,得出的結(jié)果準確可靠,檢出限好,適用于配合飼料、濃縮飼料、復(fù)合預(yù)混合飼料、維生素預(yù)混合飼料中維生素Edl-α-生育酚)的測定,僅供廣大用戶參考。

以下是維生素E的測定的詳細檢測方法

1   儀器與試劑

1.1 儀器
  LC-10Tvp高效液相色譜儀
  Vertex 色譜柱?。?/span>150mm×4.6mm×5μm

  分析天平,感量為0.0001g
   圓底燒瓶,帶回流冷凝器
  恒溫水浴鍋
  旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器
   超純水器

1.2  試劑

碘化鉀溶液。
  淀粉指示液。
  硫代硫酸鈉溶液。
  水乙醚:不含過氧化物。
  無水乙醇。
  1,4-二氧六環(huán)。
  甲醇,色譜純。
  2,6-二叔丁基對甲酚(BHT)。
       氫氧化鉀溶液。
  酚酞指示劑。
  氮氣(純度99%)。
  L-壞血酸。
  維生素Edl-α-生育酚)對照品。

2    試樣溶液的制備

2.1  皂化
  稱取適量試樣,置入圓底燒瓶中,加L-壞血酸乙醇溶液,使試樣完全分散、浸濕,置于水浴上加熱直到沸點,用氮氣吹洗稍冷卻后,加氫氧化鉀溶液,混合均勻,在氮氣流下沸騰皂化回流,不時震蕩防止試樣粘附在瓶壁上,皂化結(jié)束,分別用無水乙醇、水自冷凝管頂端沖洗其內(nèi)部,取出燒瓶冷卻至40℃。

2.2 提取
  定量的轉(zhuǎn)移全部皂化液于盛有無水乙醚的分液漏斗中,用蒸餾水分2~3次沖洗圓底燒瓶并入分液漏斗,加蓋、放氣,隨后混合,激烈震蕩,靜置、分層。轉(zhuǎn)移水相于第二個分液漏斗中,分次用乙醚重復(fù)提取兩次,棄去水相,合并三次乙醚相。用蒸餾水多次洗滌乙醚提取液至中性,初次水洗時輕輕旋搖,防止乳化。乙醚提取液通過無水硫酸鈉脫水,轉(zhuǎn)移到棕色容量瓶中,加BHT使之溶解,用乙醚定容至刻度。

2.3 濃縮
  從乙醚提取液中分取一定體積置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器燒瓶中,在部分真空、水浴溫度50℃的條件下蒸發(fā)至干或用氮氣吹干。殘渣用甲醇溶解并稀釋,離心或通過0.45μm過濾膜過濾,用于高效液相色譜儀分析。

3   色譜條件
  色譜柱:Vertex 色譜柱 150mm×4.6mm×5μm;
  流動相:甲醇+=95+5;
  流速:1.0mL/min;
  溫度:室溫;
  進樣量:20μL。

4   生育酚醋酸酯標準品的高效液相色譜圖

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